I. 操作:嫌気性環境の作り出し
1. 混合窒素ボンベと混合ガスボンベの出力圧力の調整:減圧弁を約0.1MPaに調整します。
2. 電源スイッチと温度コントローラーをオンにし、希望の温度に設定します。操作チャンバー内のインキュベーター内部の温度は、任意に選択・制御できます。
3. 使用要件に応じて必要な付属品と機器を配置し、操作チャンバー内に無毒性のビニール袋を2枚入れます。
4. 乾燥パラジウム顆粒1000g(密封)と乾燥剤500g、および嫌気性指示薬(密封)を操作チャンバー内に設置します。
5. サンプリングチャンバーの内扉と外扉をしっかりと閉じ、真空度を確認します。
6. 操作チャンバー内の二次窒素置換:
(1) ゴムチューブを操作チャンバーの空気取り入れ口に挿入し、もう一方の端をビニール袋に入れます。
(2) 窒素導入口を接続し、窒素制御弁を開き、両方のビニール袋に窒素を充填し、袋の開口部をしっかりと結びます。
(3) 観察パネルのフランジリングにラテックス手袋をはめ、しっかりと結びます。
(4) ビニール袋から操作チャンバー内に窒素を徐々に放出し、すべての窒素が放出されるまで続けます。
7. 運転室内の二次窒素置換:窒素充填プロセスを繰り返し、排気弁の開閉を随時確認してください。
8. 運転室内の三次混合ガス置換:
(混合ガス比:N2 90%、H2 5%、CO2 5%)
(1)ガス経路を変更し、混合ガス入口弁を開き、充填中は排気弁を随時開閉してください。
(2)混合ガスがビニール袋に充填されたら、混合ガス直通弁(三方弁)を閉じます。
(3)ビニール袋から運転室内に混合ガスを徐々に放出します。
(4)3回の空気置換後、運転室内の酸素濃度は微量まで低下します。
9. 運転室内のパラジウム顆粒酸素除去装置を作動させ、酸素触媒脱酸素装置に電源を接続します。1時間後、嫌気性指示薬ストリップの色変化を観察します。色の変化は、操作チャンバーが嫌気性環境に達したことを示します。
10. 紫外線殺菌ランプを点灯し、チャンバーを殺菌します。殺菌時間はユーザーが設定します。
II. 細菌株の配置と培養
1. サンプリングチャンバーのドアを確認し、閉めます。
2. サンプリングチャンバーの外側ドアを開け、細菌株をサンプリングチャンバーに入れ、外側ドアを閉じます。
3. サンプリングチャンバー内で窒素パージと置換を3回行います。まず、500 mmHg (66 kPa) 以上の真空度まで排気し、次に窒素バルブを手動で開けてポインターがゼロに戻るまで待ってから、次の操作に進みます。
4. 真空度が低い場合は、置換回数を増やす必要があります。 5. サンプリング室のドアを開閉した後、点検および補助のために100 mmHg(13 kPa)の低真空をかけること。
6. 嫌気性インキュベーターの長期連続使用条件:
(1) 操作室の嫌気性インジケーターバーを毎日観察すること。正常であれば継続使用が可能。異常であれば空気を交換すること。
(2) 添加した水素が微量の酸素と結合して触媒吸収を起こし、嫌気状態を維持するために、少量の混合ガスを連続的に導入すること。混合ガスの流量は約10 ml/分とする。
(3) 乾燥剤と乾燥ガスは、連続培養3日ごとに交換すること。
7.接種棒滅菌器の使用方法:
(1)ニッケルクロム電熱線を用いて接種棒を短絡させ、赤熱するまで加熱して滅菌する。
(2)ワックス融点を接種棒に直接当て、試験管の封蝋開口部を回転させてワックスを溶かす。