オートクレーブの滅菌効果の検証

技術的な知識 2019-04-04 09:54:16
高圧蒸気滅菌器は、微生物実験の基本的な保証である滅菌要件を達成するために物品を滅菌します。 オートクレーブ滅菌の認定は、実験を成功させるための最も基本的かつ重要な最初のステップです。 加熱して溶解するだけでオートクレーブ処理が不要な少量の培地を除いて、ほとんどの培地は121°Cで15〜30分間オートクレーブ処理されます。 特に、滅菌試験培地の滅菌は完全ではなく、サンプルの滅菌試験の結果に直接関係しています。 したがって、オートクレーブの滅菌効果を検証する必要があります。 この目的のために、滅菌の有効性を検証するための簡単で実行可能な方法を提供します。

1。実験資料

(1)Bacillus stearothermophilus紙(3M Companyが販売している試験管のセットも入手可能)。 Bacillusstearothermophilus。

ATCC7053は、この方法で一般的に使用される生物学的指標細菌であり、5細胞のCFU /錠剤を含んでいます。

(2)121°Cの圧力蒸気滅菌化学インジケーターカード(一般的な滅菌インジケーターテープも利用可能)。

(3)ブロモクレゾール紫斑水培地を116℃で20分間オートクレーブ処理した後、使用した(3M Companyが販売している試験管など、この培地は使用できない場合があります)。

(4)O-150°C残留温度計(計測局が要求する校正)。


2.方法と結果

Bacillus stearothermophilus紙(以下、バクテリア錠と呼ぶ)を、滅菌鉗子を備えた密封試験管に入れた。化学指示薬カードとスポット温度計は、開いた試験管に入れられます。上記の2本のチューブをそれぞれ5〜10個用意します。それらをオートクレーブ蒸気ポート、下部排気ポート、下部水出口、または上下左右の中央に配置します。滅菌器が2階にある場合は、10か所置く必要があります。

残りの温度計は、標準化された後、検証テストに使用できます。テストの前に、温度計の水銀柱を40°C未満に粉砕する必要があります。各モニタリング後の温度計の温度差は1°Cの間である必要があります。これは、滅菌器内の温度分布が均一であることを示しています。

滅菌されたプラークは、色の変化を観察するために、滅菌されたブロモクレゾールプリン水培地下で滅菌無菌条件下で56〜60°Cで24〜48時間培養する必要があります。培地が黄色に変わった場合、錠剤中のB. stearothermophilusは完全に不活化されておらず、細菌は培地中で増殖することができ、グルコースは分解されて酸を黄色に生成します。培地の色が変わらない場合は、まだ紫色であり、胞子が不活性化されていることを示しています。同時に、滅菌されていない紙を陽性対照として培地に入れ、紙を含まないブランク培地を陰性対照として使用した。

オートクレーブ中、ケミカルインジケーターカードのインジケーターの色が淡黄色から黒色に変わります。色の濃さが変化し、対照色と比較して、滅菌効果が要件を満たしているかどうかを判断できます。化学指示薬カードは乾燥した場所に保管する必要があります。湿気にさらされると変色し、殺菌効果の観察に影響を与えます。

高圧蒸気滅菌は、蒸気が滅菌器にスムーズに流入し、滅菌済みアイテムと接触し、元の冷気を排出して滅菌効果を達成できるようにする必要があります。無負荷時の熱分布と全負荷時の熱浸透検証を実行します(全負荷時の総体積の2/3以下)。 2回の検証を3回繰り返し、合計6回行いました。

5つのポイントと6つのテストでは、温度が121°Cで、化学インジケーターカードが黒くなったことが示されました。程度は対照色と一致していた。培地の色は変化せず、高圧蒸気滅菌効果が認められたことを示しています。

オートクレーブは強力な機器ですが、強力な検査は機器の物理的パラメータの検査にすぎません。したがって、強力な検査を受けた滅菌器は、滅菌効果も検証する必要があります。一部のユニットは、この重要な問題を見落としがちです。家庭用携帯型滅菌器では、計器のポインターが必要な温度に達することがよくありますが、滅菌された物品の実際の温度は要件を満たしていません。滅菌済みのアイテムへのリードは完全ではなく、実験の結果に影響を与えます。培地は完全に滅菌されておらず、培地の使用に影響を与え、結果を判断します。したがって、オートクレーブの無菌効果の検証は真剣に受け止めなければならない問題です。

高圧蒸気滅菌器を使用する場合は、最初に蒸気を開くときに滅菌器から冷気を取り除くように注意してください。ユニット内のすべての冷気を取り除く前に、ベントホールを閉じる必要があります。

滅菌器に空気が残っている場合、圧力計は特定の圧力値に達していますが、デバイス内の温度は対応する程度に達していません。残っている空気が多いほど、両者の差が大きくなり、装置内の温度が不十分になり、滅菌が完了しません。 (多くの人は、発酵培地で滅菌すると小さなカテーテルに気泡が入ります。滅菌器からより多くの冷気を排出しようとすることも可能かもしれません。それは奇跡的な効果があります)。

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